بیوتکنولوژی و نانوتکنولوژی
مهتا مجدنیا؛ مریم صدرنیا؛ فاطمه شهبازی؛ نوشین سهرابی
چکیده
مقدمه: یکی از بهترین راهکارها جهت حذف فلزات سمی، استفاده از باکتری های مقاوم به این فلزات با فرآیند پاک سازی زیستی می باشد. هدف از این پژوهش جداسازی باکتریهای مقاوم به قلع، مس، کروم و نیکل از پسابهای صنعتی و شناسایی مولکولی آنها می باشد.
مواد و روش ها: ابتدا از کارخانه های آبکاری واقع در استان تهران، پساب آلوده به فلزات سنگین جمع آوری ...
بیشتر
مقدمه: یکی از بهترین راهکارها جهت حذف فلزات سمی، استفاده از باکتری های مقاوم به این فلزات با فرآیند پاک سازی زیستی می باشد. هدف از این پژوهش جداسازی باکتریهای مقاوم به قلع، مس، کروم و نیکل از پسابهای صنعتی و شناسایی مولکولی آنها می باشد.
مواد و روش ها: ابتدا از کارخانه های آبکاری واقع در استان تهران، پساب آلوده به فلزات سنگین جمع آوری گردید. نمونه پساب بر روی محیط LB Agarحاوی غلظت های مشخص از فلزات سنگین کشت داده و باکتری های رشد یافته جداسازی گردید. بر روی باکتری های رشد یافته،حداقل غلظت مهار کننده رشد(MIC) فلزات سنگین با میکروبراث دایلوشن متد انجام شد. DNA ژنومی دو سویه با بالاترین میزان مقاومت، تخلیص و PCR با کمک پرایمرهای اختصاصی انجام شد.محصول PCR تعیین سکانس شده و ریبوتایپینگ انجام گردید.
نتایج: از پساب حاوی فلزات سنگین، تعداد 9 باسیل گرم مثبت و منفی و کوکوباسیل گرم منفی جداسازی گردیدند. دو سویه باسیل گرم منفی بیشترین مقاومت نسبت به فلزات سنگین را در آزمایش MIC از خود نشان دادند. این دو سویه بر اساس نتایج تعیین توالی، تحت عناوین انتروباکتر و سودوموناس شناسایی گردیدند.
نتیجه گیری: دو سویه با بالاترین مقاومت به چهار فلز از پساب کارخانجات آبکاری جدا شده و به روش ارزیابی فیلوژنتیک مورد شناسایی مولکولی قرار گرفتند. می توان از این باکتری ها در تصفیه زیستی پساب های حاوی فلزات سنگین استفاده نمود.
بیوتکنولوژی و نانوتکنولوژی
نعیمه خزلی؛ مریم صدرنیا؛ رضا حاجی حسینی
چکیده
زمینه و هدف: لیپازهای میکروبی، گروه مهمی از آنزیمهای باارزش بیوتکنولوژی محسوب میشوند. در تحقیق حاضر تلاش شد تا سویه‌های میکروبی تولیدکننده لیپاز ازنمونه‌های پسابهای صنعتی جداسازی و شناسایی شوند.مواد و روشها: پس ازنمونه‌برداری از فاضلاب و پساب محل‌های مختلف، 16 کلونی از این نمونه‌ها جداسازی شد. جدایه‌ها برای بررسی توانایی ...
بیشتر
زمینه و هدف: لیپازهای میکروبی، گروه مهمی از آنزیمهای باارزش بیوتکنولوژی محسوب میشوند. در تحقیق حاضر تلاش شد تا سویه‌های میکروبی تولیدکننده لیپاز ازنمونه‌های پسابهای صنعتی جداسازی و شناسایی شوند.مواد و روشها: پس ازنمونه‌برداری از فاضلاب و پساب محل‌های مختلف، 16 کلونی از این نمونه‌ها جداسازی شد. جدایه‌ها برای بررسی توانایی تولید آنزیم لیپاز، همراه با یک سویه اکتینومیست به‌عنوان کنترل مثبت، در محیط کشت اختصاصی حاوی تویین80، کشت داده شدند. فعالیت آنزیمی براساس نمودار استاندارد لیپاز، بررسی شد. به‌منظور تشخیص مولکولی جدایه‌ها ریبوتایپینگ انجام شد. بدین منظور، DNA جدایه‌ها با کمک کیت، استخراج شدند و با الکتروفورز و دستگاه نانودراپ ارزیابی گردید. سپس PCR با کمک پرایمرهای ژن 16SrRNA صورت گرفته و محصول PCR تعیین توالی شده و با استفاده از بلاست توالی‌ها در پایگاه داده NCBI، سویه‌ها شناسایی شدند.یافته ها: از مجموع 6 جدایه، ده سویه (62/5 درصد) قادر به تولید آنزیم لیپاز و در نتیجه ایجاد هاله شفاف در محیط کشت حاوی لیپید بودند. از این میان، دو جدایه با میزان تشکیل هاله و منبع جداسازی مشابه که بیشترین رشد و فعالیت را در 144 ساعت پس از کشت نشان داده بودند، انتخاب شدند. مقادیر فعالیت آنزیمی برای باکتری جداشده از پساب کشتارگاه و پساب مکانیکی به‌ترتیب در بازه بین 2/99 تا 22/65 و 3/73 تا39/2 واحد بر میلی‌لیتر بود.نتیجه‌گیری: باکتریهای آئروموناس ورونی و کوپریاویدوس متالیدورانس به دلیل فعالیت لیپازی بسیار بالا نسبت به سویه های معرفی‌شده در سایر تحقیقات، به‌عنوان سویه‌های بسیارمناسب و کارآمد جهت تصفیه زیستی پساب‌ها پیشنهاد میگردد.